Millipore通過聚合材料沉淀或拉伸制成的膜濾器,可用于多種應(yīng)用(如過濾、空氣顆粒物監(jiān)測)。濾膜性質(zhì)因其組成、制造方法、表面處理技術(shù)和孔徑而存在顯著差異。超濾管采用離心方式快速處理樣品,是很多科研小伙伴們每天要用到的基本裝備。但是,在推出超濾管中文說明書(AU0.5/4/15)之前,我們發(fā)現(xiàn)近90%的使用者在選擇和使用過程中因?yàn)槿狈Ρ匾畔⒍鴽]有獲得理想體驗(yàn),更重要的是,寶貴的樣本會遭受本可避免的損失。
超濾是大分子脫鹽、濃縮方便的方法,重復(fù)性好,得率有保障,已經(jīng)在蛋白、抗體、病毒、核酸、囊泡等樣品制備中建立標(biāo)準(zhǔn)操作;在目前大熱的外泌體制備中也已經(jīng)成為主流方法。
選對截留分子量,事半功倍:
如果目的蛋白是120kDa,請問應(yīng)該選擇的超濾管規(guī)格是100k,50k,還是30k甚至10k?你采用的是1/2,1/3抑或1/6算法?這些沒有統(tǒng)一的說法,是因?yàn)椴煌瑥S家的膜的截留分子量的定義不同。Millipore的超濾管采用其*的再生纖維素膜,定義為:一個(gè)確定NMWL的超濾膜應(yīng)該截留至少90%以上的這個(gè)大小的球形分子,即100kDa的球形蛋白用100k的Ultracel®再生纖維素膜得率超過90%。
預(yù)過濾和深度過濾器:
1、預(yù)過濾:預(yù)過濾利用大孔徑膜濾器從樣品中去除大顆粒物(如污垢或沉積物),之后再利用孔徑更小的膜濾器進(jìn)一步過濾。在樣品制備過程中,可借助預(yù)過濾避免過濾器過早堵塞或結(jié)垢。
2、深度過濾器:深度過濾器可將顆粒物截留在內(nèi)部,而非過濾器表面。由于具有較高的顆粒截留能力,深度過濾器常用于預(yù)過濾。
3、粘合劑:粘合劑常用于非織造纖維基材料,可為最終產(chǎn)品提供塑形和強(qiáng)度。盡管玻璃纖維過濾器常使用粘合劑,但這類添加成分會降低熱穩(wěn)定性,并可能導(dǎo)致可溶出物污染樣品。
4、濾網(wǎng):濾網(wǎng)具有尺寸均勻的大孔徑和網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),用于去除大顆粒物(如細(xì)胞、蛋白質(zhì)、污垢),以澄清顆粒物分析溶液。